一、填空题1. λ噬菌体载体主要有两种类型,插入型和置换型。就酶切位点来说,插入型为______个;置换型为______个。
2. M13噬菌体DNA的复制分为三个阶段:______、______和______。
3. 噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的,其中来自质粒的结构主要是______和______;来自噬菌体的主要结构是______。
4. λ噬菌体由于包装的限制,插入外源DNA片段后,总长度应在噬菌体基因组的______范围内。
5. 引物在基因工程中至少有4方面的用途:______、______、______和______。
合成cDNA 合成探针 PCR引物 DNA序列测定
6. 利用Taq DNA聚合酶进行PCR反应所得产物不是平末端,而是在______端带有一个突出的______;据此人们设计了PCR产物的______克隆法。
7. 简并引物PCR主要是依据蛋白质的氨基酸序列设计______引物来扩增相应的基因。
8. 现有的克隆基因的策略大体上可以分为三类:______、______和______。
9. DNA重组连接的方法大致有4种:______、______、______和______。
10. SD序列是mRNA分子中与______结合的序列,位于______密码子的上游;在基因组中的对应位置是______位点与______位点之间。
11. 携带有外源基因并能持久传递给子代的植物称为______植物;这些外源基因就叫做______。
12. 重组子的筛选有两层含义,一是______;二是______。
区分重组子和非重组子 区分带有重组子和非重组子的大肠杆菌
13. 限制性内切核酸酶切割DNA后产生5′端突出的黏性末端,可以用______进行3′端标记;如果限制性内切核酸酶切割DNA后产生3′端突出的黏性末端,可以用______进行5′标记。
14. 为了获得单链标记的DNA探针可以采用以下三种方法:______、______和______。
15. 根据Northern杂交的结果可以说明______;根据Southern杂交的结果可以说明______;根据Western杂交的结果可以说明______;根据原位杂交的结果可以说明______。
基因是否转录和mRNA的大小 DNA是否存在和酶切片段的大小 相应抗原的存在 互补序列的位置
16. Northern杂交和Southern杂交的根本区别在于______和______。
17. 欲将某一具有单链突出末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式,通常采用的方法有______和______。
18. 由于不同构型的DNA插入EB的量的不同,它们在琼脂糖凝胶电泳中迁移率也不同,sc DNA的泳动速度______;oc DNA的泳动速度______;1 DNA居中。
19. 在基因工程中,导入外源基因的主要方法有______、______、______
和______等。
20. 在基因组计划中用来构建人基因组DNA文库的载体通常有4种,分别是______、______、______和______。
21. 反向PCR的方法通常用来______;重组PCR的方法通常用来______;原位PCR的方法通常用来______。
扩增已知片段两侧的序列 连接两个DNA片段 获得靶序列的位置信息
23. 为对某一生物的基因进行全面的研究,只需建立______个基因组文库,同时必须建立______个cDNA文库。
24. 双脱氧链终止法测定DNA碱基序列需要的试剂为______、______、______和______等。
25. Taq DNA聚合酶需要适当浓度的Mg
2+才能发挥作用。Mg
2+浓度升高对Taq DNA聚合酶的效应是______;Mg
2+浓度降低,对Taq DNA聚合酶的效应是______。
26. 普通质粒载体、λ噬菌体载体、黏粒载体和噬菌粒的容量由大到小依次为______、______、______和______。
27. 目前栽培面积较大的5种农作物是______、______、______、______和______。其中以______为最大。
28. 外源基因导入植物细胞的方法为______、______和______。
29. 外源基因导入动物受精卵的方法有______、______、______、______和______。
显微注射 病毒侵染 细胞移植 细胞核移植 精子介导
30. 大肠杆菌中选择性标记一般为______;酵母菌中选择性标记一般为______。
31. 核型多角体病毒有两种表现型______和______;分别感染______和______。