一、填空题2. 原核生物的核糖体为______S,其大亚基为______S,小亚基为______S;真核生物的核糖体为______S,其大亚基为______S,小亚基为______S。
3. 一种植物的染色体数目2n=10,在减数第一次分裂中期每一个细胞含有______条染色体,在减数第二次分裂中期含有______条染色体。
4. 在真核生物细胞器中,只有______和______携带有遗传物质。
5. 人类有23对染色体,经过减数分裂可形成______种遗传组成不同的配子。
6. 在减数分裂过程中,减数第一次分裂是指______的分裂,减数第二次分裂是______的分裂。
7. 某些染色体具有______,它把短臂分成两部分,外端部分称为______,具有组成______的特殊功能。
8. 无籽西瓜有______个染色体组,______个同源组,每个同源组含______条染色体。
9. 染色体是由______在______上绕1.75圈组成核小体,再经复杂的螺旋化而形成的。
10. 在真核生物细胞有丝分裂的______最后阶段,开始逐渐形成纺锤体,到达______,核膜和核仁消失。
11. 高等真核生物有性生殖的雌雄配子是通过______形成的,其结果使体细胞的染色体数目______。
二、判断题5. 在真核生物核内,五种组蛋白(H
1、H
2A、H
2B、H
3、H
4)在进化过程中,H
4极为保守,H
2A最不保守。( )
对 错
四、简答题1. 简述植物染色体核型分析的基本步骤。
植物核型分析的主要步骤包括:
(1)制片。制片主要包含以下几个步骤。①取材:作为染色体制备材料部位必须准确,如根尖、芽、节间等部位(即细胞正处在生长分裂旺盛时期);材料必须少而精、忌多而杂,同时材料要新鲜。在本实验中要将种子浸泡一天,然后摆种,待根长出1cm左右即可。②预处理:将已长出根的种子浸泡在0.2%秋水仙素溶液中在25℃中培养4h。③前低渗:切取根尖(1~2mm左右)30个放入蒸馏水中,动作要迅速,不要使根尖缺水。在25℃左右条件下处理30min。④酶解:吸干水,加入混合酶液刚好没过材料即可,切忌过多,在25℃下酶解2~4h,酶解时间还得凭经验多次掌握才行。⑤低渗:将酶液去除后,在酶解材料瓶中慢慢加入25~30℃双蒸水,轻轻冲洗2或3次,加入双蒸水根据酶解消化程度,在双蒸水中停留10~40min进行复低渗处理。⑥固定:低渗后的材料,用3:1的甲醇:冰醋酸固定30min。⑦涂片:将材料放在预先在蒸馏水中冷冻的清洁载片上,然后用镊子尖迅速将材料敲碎涂布,再滴一滴固定液用嘴吹,使细胞均匀的散开在载片上,动作要迅速。⑧干燥:迅速将载片移到酒精灯上过火1或2次,然后将载片在空气中干燥,才可进行染色。⑨染色:将Giemsa母液用蒸馏水1:20稀释、染色。染色方法是将玻璃板上牙签的距离稍比载玻片长度短一些。使片架在两牙签上,有材料的面朝下,然后往载片与玻璃板之间的空隙加染液,染色15~30min即可。染色后将载片在自来水上冲一下,迅速甩掉附在载片上的水,在空气中干燥后,即可观察。
(2)拍照。用显微摄影的方法拍摄中期分裂相。
(3)剪贴。用眼科剪刀,沿染色体边缘将每一条染色体剪下来,存放在小培养皿内。
(4)配对。目测配对,根据染色体长短和形态特征,进行同源染色体配对。
(5)排列。按一定顺序将一个细胞内的染色体进行排队、编号。排列方式有多种,一般从大到小排列,如玉米、草棉核型;相同长度的染色体,按短臂长度排列,短臂长的在前;有特殊标记的染色体(如随体)可特殊排列,如栽培大麦核型;性染色体单独另排或放在最后。也可将形态相同的染色体归为一组,分成若干组,按组排列,如山羊草属植物染色体核型;异源多倍体要根据不同染色体组排列,如普通小麦核型要按A、B、D三个染色体组排列。
(6)测量。利用测量工具,测量染色体的如下数据:①绝对长度=照片长度/放大倍数;②每对染色体短臂绝对长度;③每对染色体长臂绝对长度;④染色体短臂总长度;⑤染色体长臂总长度;⑥相对长度;a.每对同源染色体短臂相对长度:短臂相对长度一染色体短臂绝对长度/染色体短臂总长度,b.每对同源染色体长臂相对长度:长臂相对长度=染色体长臂绝对长度/染色体长臂总长度c.每对同源染色体相对长度:染色体相对长度=每对同源染色体绝对长度/染色体总长度;⑦臂比:臂比=染色体长臂/染色体短臂;⑧臂指数:着丝点指数=短臂长/染色体全长
2. 巴氏小体的本质是什么?莱昂假说的主要内容是什么?以女性口腔黏膜上皮细胞为材料,巴氏小体制片的主要步骤是什么?
1949年,Barr等在雌猫神经元细胞核中发现一种浓缩小体,在雄猫中则见不到这一结构,称之为巴氏小体。进一步研究发现,除猫以外,其他雌性哺乳类动物(包括人类)也同样有这种显示性别差异的结构。而且不仅是神经元细胞,在其他细胞的间期核中也可以见到这一结构。其实质是雌性哺乳动物间期细胞的细胞核内一条X染色体失活凝缩而形成的、在显微镜下呈深染状态的结构,又称为性染色质,也称X染色质。
Lyon假说的主要内容如下:①失活发生在胚胎发育早期(人类晚期囊胚期);②X染色体的失活是随机的,异固缩的X染色体可以来自父亲也可以来自母亲;③失活是完全的,雌性哺乳动物体细胞内仅有一条X染色体是有活性的,另一条X染色体在遗传上是失活的;④失活是永久的和克隆式繁殖的。一旦某一特定的细胞内的X染色体失活,那么由此细胞而增殖的所有子代细胞也总是这一个X染色体失活。如果是父源的X染色体失活,则其子细胞中失活的X染色体也是父源的,所有这个细胞的子代细胞中都将表达有活性的母源X染色体。因此,失活是随机的,但却是恒定的。
以女性口腔黏膜上皮细胞为材料,巴氏小体制片的主要步骤如下:①涂片。受检者用水漱口后,以牙签的钝头刮取口腔颊部黏膜,来回几次,将刮起之细胞均匀涂在载玻片上。②固定。涂片后,不等玻片干燥,立即将涂片放入甲醇/冰醋酸固定液(3:1)中固定15min。③晾干。④染色。在涂片处加数滴硫堇染液,染色10~15min。再用自来水冲洗,晾干后镜检。
3. 简述染色体、DNA、基因三者之间的相互关系,并说明基因的现代概念。
染色体是DNA的主要载体;基因是有遗传效应的DNA片段;基因在染色体上呈线性排列。
染色体由DNA、组蛋白、非组蛋白和少量的RNA组成。染色体由无数个重复的核小体亚单位(nucleosome)构成的。核小体是4种组蛋白(H2A、H2B、H3、H4)各2个分子,组成的八聚体核心表面围以长约146bp的DNA双螺旋所构成的,此时DNA分子被压缩了6倍。组蛋白H1位于相邻的两个核小体的连接区DNA表面,核小体进一步折叠或卷曲产生1/40倍压缩的30nm纤维状结构,相当于基本染色质丝。染色质丝进一步螺旋化,形成环状结构,这些环的基部附着于非组蛋白构成的“支架”上。这种纤维的直径约为240mn,它可能是间期染色体的最终包装水平,称为染色单体丝。染色体包装的最后阶段发生在细胞进入有丝分裂或减数分裂时。染色单体丝通过围绕中心轴螺旋缠绕和向染色体中心方向的压缩作用形成染色体。至此,几厘米长的DNA成为了几微米长的染色体,其长度约为原来的万分之一。这种有效的包装方式,使细胞在分裂过程中能够把携带遗传信息的DNA从染色体形式平均分配给子细胞。根据目前的认识基因应该是能够表达和产生基因产物(蛋白质式RNA)的DNA序列,根据产物的类别可以分为蛋白质基因和RNA基因(rRNA基因和tRNA基因)两大类;根据产物的功能可以分为结构基因和调节基因两大类。
4. 从分子遗传学或生物化学的角度看,异染色质和常染色质有何不同?
染色质是问期细胞核中伸展开的DNA蛋白质纤维。间期细胞核的染色质可根据其所含核蛋白分子螺旋化程度及功能状态的不同,分为常染色质(euchromatin)和异染色质(heterochlomatin)两类。
常染色质在细胞间期螺旋化程度低,呈松散状,染色较浅而均匀,含有单一或重复序列的DNA,具有转录活性,常位于间期细胞核的中央部位。从分子遗传学或生物化学的角度来看,常染色质区域多是基因所在的区域,结构相对松散,便于转录。异染色质在细胞间期螺旋化程度较高,呈凝集状态,而且染色较深,多分布在核膜内表面,其DNA复制较晚,含有重复DNA序列,很少进行转录或无转录活性,为间期核中不活跃的染色质。异染色质通常具有三个特点:①在细胞间期处于凝缩状态;②是遗传惰性区,只含有不表达的基因;③复制时间晚于其他染色质区域。异染色质又分为两种:一种称为专性异染色质或称结构异染色质(constitutive heterochrornatin),结构异染色质是异染色质的主要类型,这类异染色质在各种细胞中总是处于凝缩状态,一般为高度重复的DNA序列,没有转录活性,常见于染色体的着丝粒区、端粒区、次缢痕,以及Y染色体长臂远端2/3区段等;另一种叫兼性异染色质(facultative heterochromatin),也叫功能异染色质,这类染色质是在特定细胞或在一定发育阶段由常染色质凝缩转变而形成的。浓缩时,基因失去了活性,无转录功能;当其处于松散状态时,又能够转变为常染色质,恢复其转录活性。如X染色质就是一种兼性异染色质。从分子遗传学或生物化学角度来看,异染色质大部分为不含有基因的DNA部分,或所含有的基因不进行转录。
5. 简述真核生物细胞核内染色质的结构与功能。
染色体由DNA、组蛋白、非组蛋白和少量的RNA组成。染色体由无数个重复的核小体亚单位(nucleosome)构成的。核小体是4种组蛋白(H2A、H2B、H3、H4各2个分子)组成的八聚体核心表面围以长约146bp的DNA双螺旋所构成的,此时DNA分子被压缩了6倍。组蛋白H1位于相邻的两个核小体的连接区DNA表面,核小体进一步折叠或卷曲产生1/40倍压缩的30nm纤维状结构,相当于基本染色质丝。染色质丝进一步螺旋化,形成环状结构,这些环的基部附着于非组蛋白构成的“支架”上。这种纤维的直径约为240nm,它可能是间期染色体的最终包装水平,称为染色单体丝。染色体包装的最后阶段发生在细胞进入有丝分裂或减数分裂时。染色单体丝通过围绕中心轴螺旋缠绕和向染色体中心方向的压缩作用形成染色体。至此,几厘米长的DNA成为了几微米长的染色体,其长度约为原来的万分之一。这种有效的包装方式,使细胞在分裂过程中能够把携带遗传信息的DNA从染色体形式平均分配给子细胞。
6. 简述染色体端粒的结构与功能。
端粒是位于染色体3'端的一段富含G的DNA重复序列,端粒和端粒结合蛋白组成核蛋白复合物,广泛存在于真核生物细胞中,不同种类细胞的端粒重复单位不同,大多数长5~8bp,由这些重复单位组成的端粒,突出于其互补链12~16个核苷酸内。人类端粒由5'TTAGGG3'的重复单位构成,长度为5~15kb。与端粒特异性结合的是端粒结合蛋白,人类染色体末端的DNA-蛋白复合体的结构还不清楚。
端粒高度的保守性表明,端粒具有非常重要的作用。其主要功能包括:①保护染色体末端。真核生物的端粒DNA-蛋白复合物如帽子一般,保护染色体末端免于被化学修饰或被核酶降解,同时可能还有防止端粒酶对端粒进行进一步延伸的作用。改变端粒酶的模板序列将导致端粒的改变,从而诱导细胞衰老和死亡。②防止染色体复制时末端丢失。细胞分裂、染色体进行半保留复制时,存在染色体末端丢失的问题。随着细胞的不断分裂,DNA丢失过多,将导致染色体断端彼此发生融合,形成双中心染色体、环状染色体或其他不稳定形式。端粒的存在可以起到缓冲保护的作用,从而防止染色体在复制过程中发生丢失或形成不稳定结构。③决定细胞的寿命。染色体复制的上述特点决定了细胞分裂的次数是有限的,端粒的长度决定了细胞的寿命,故而被称为“生命的时钟”。④固定染色体位置。染色体的末端位于细胞核边缘,人类端粒DNA和核基质中的蛋白质相互作用,以'TTAGGG'结构附着于细胞核基质(包括nuclear envelope和internal protein)。
7. 简述染色质。
常染色质在细胞间期螺旋化程度低,呈松散状,染色较浅而均匀,含有单一或重复序列的DNA,具有转录活性,常位于间期细胞核的中央部位。愈是活跃进行基因转录和蛋白质合成的细胞,共常染色质的区域愈大。也就是说,各个细胞中常染色质所占的比例随细胞的分化程度和功能状态不同而有较大的变化。在特定细胞或在一定发育阶段,常染色质和异染色质之间可以相互转化,常染色质经凝缩可以转变为异染色质。在浓缩时,基因失去了活性,无转录功能;当其处于松散状态时,又能够转变为常染色质,恢复其转录活性,如X染色质。
8. 核小体包括什么?
核小体由核心颗粒(core particle)和连接区(linker)两部分组成。核心颗粒的核心是由4种组蛋白(H2A、H2B、H3、H4各2个分子)形成的八聚体及围绕在八聚体周围的DNA所组成,直径约11nm。这段DNA称为核心DNA,约为146bp,围绕核心外围1.75圈。两个核心之间时DNA称为连接区,这段DNA长约60bp,组蛋白H1位于相邻的两个核小体的连接区DNA表面,连接区的DNA长度差异较大,短的只有8bp,长的可达114bp。
9. 简述原核生物与真核生物基因组的区别。
原核生物基因组与真核生物基因组有以下几方面的不同:①每一种真核生物都有一定的染色体数目,除了配子(精子和卵细胞)为单倍体外,体细胞一般为双倍体,即含两份同源的基因组,而原核生物的基因组则是单拷贝的,基因组通常仅由一条环状双链DNA分子组成。②真核生物基因组远远大于原核生物基因组,结构复杂,基因数庞大,具有许多复制起点,每个复制子大小不一,而原核生物基因组中只有一个复制起点。③真核基因都由一个结构基因(structure gene)与相关的调控区组成,转录产物为单顺反子(monocistron),即一分子mRNA只能翻译成一种蛋白质;而原核生物基因组内具有操纵子结构,即数个功能上相关联的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)和下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子。④真核生物基因组中含有大量的重复序列,而原核生物基因组中重复序列很少。⑤真核生物基因组内非编码的序列(non-coding sequence,NCS)占90%以上,而原核生物基因组中非编码序列约占基因组的50%,远远小于真核生物,非编码区主要是一些调控序列。⑥绝大多数真核基因是断裂基因(split gene),即编码序列被非编码序列分隔开来;而原核生物的基因是连续的,无内含子,因此转录后不需要剪切。⑦在真核生物中,功能相关的基因构成各种基因家族,它们可串联在一起,亦可相距很远,但即使串联在一起的成簇的基因也是分别转录的,不同于原核生物的操纵子。